高效液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環）、篩板（濾片）、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，壓力不高于70bar時，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內壁要求有很高的光潔度。為提高柱效，減小管壁效應，不銹鋼柱內壁多經過拋光。還有使用熔融硅或玻璃襯里的，用于細管柱。色譜柱兩端的柱接頭內裝有篩板，取決于填料粒度，目的是防止填料漏出。
高效液相色譜柱的系統由儲液器、泵、進樣器、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱（固定相）內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中作相對運動時，經過反復多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來。
如何更好的使用高效液相色譜柱，延長柱壽命？
1、拿到高效液相色譜柱后先閱讀說明書，了解具體性能：耐受溫度、耐受PH等。以及沖洗和保存條件。經過柱校測試確認本身沒有問題后方可正常使用。
2、樣品充分前處理，確保樣品的潔凈；使用保護柱或在線過濾器，根據實際情況更換保護柱芯或濾片。
3、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。
4、應逐漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中如果流動相中使用了緩沖鹽，避免出現鹽析。
5、選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以避免固定相被破壞，PH過低共價鍵斷裂，鍵和相水解；PH過高硅膠溶解。
6、使用過程中，如果壓力升高，或出現污染，選擇適當的條件沖洗或反沖。
